style="width:8.37344in;height:0.63998in" /> (1) 本文是学习GB-T 8314-2013 茶 游离氨基酸总量的测定. 而整理的学习笔记,分享出来希望更多人受益,如果存在侵权请及时联系我们
本标准规定了茶叶中游离氨基酸总量测定的仪器和用具、试剂和溶液、操作方法及结果计算的
方法。
本标准适用于茶叶中游离氨基酸总量的测定。
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GB/T 8302 茶 取样
GB/T 8303 茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定
GB/T 8312 茶 咖啡碱测定
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
游离氨基酸 free amino acids
茶叶水浸出物中呈游离状态存在的具有α-氨基的有机酸。
α-氨基酸在 pH8.0
的条件下与茚三酮共热，形成紫色络合物，用分光光度法在特定的波长下测定
其含量。
5.1 分析天平：感量0.001 g。
6.1 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯(AR), 水为蒸馏水。
6.2.1 1/15 mol/L 磷酸氢二钠：称取23.9 g 十二水磷酸氢二钠(Na₂HPO₄ ·
12H₂O), 加水溶解后转入
GB/T 8314—2013
6.2.2 1/15 mol/L 磷酸二氢钾：称取经110℃烘干2 h
的磷酸二氢钾(KH₂PO₄)9.08 g,加水溶解后转
入 1 L 容量瓶中，定容至刻度，摇匀。
6.2.3 取1/15 mol/L 的磷酸氢二钠溶液(6.2.1)95 mL 和1/15 mol/L
磷酸二氢钾溶液(6.2.2)5 mL, 混匀，该混合溶液 pH 为8.0。
6.3 2 % 茚 三 酮 溶 液 ： 称 取 水 合 茚 三 酮 ( 纯 度 不 低 于 9 9 %
) 2 g, 加 5 0 mL 水 和 8 0 mg 氯 化 亚 锡 (SnCl₂ ·2H₂O)
搅拌均匀。分次加少量水溶解，放在暗处，静置一昼夜，过滤后加水定容至100
mL。
6.4.1 10 mg/mL 标准储备液：称取250 mg
茶氨酸或谷氨酸(纯度不低于99%)溶于适量水中，转移 定容至25 mL,
摇匀。该标准储备液1 mL 含 有 1 0 mg 的茶氨酸或谷氨酸。
6.4.2 移取0.0 mL 、1.0 mL 、1.5 mL 、2.0 mL 、2.5 mL 、3.0 mL
标准储备液(6.4. 1),分别加水定容至 50mL, 摇匀。该系列标准工作液1 mL
分别含有0 mg 、0.2 mg 、0.3 mg 、0.4 mg 、0.5 mg 、0.6 mg 茶氨酸
或谷氨酸。
按 GB/T 8302 的规定。
按 GB/T 8303 的规定。
按 GB/T 8312 中4.4. 1的规定。
准确吸取试液(7.3.1)1 mL, 注入25 mL 比色管(5.3)中，加0.5 mL pH8.0
磷酸盐缓冲液(6.2)和 0.5mL2% 茚三酮溶液(6.3),在沸水浴中加热15 min 。
待冷却后加水定容至25 mL 。 放置10 min 后 ，
用 5 mm 比色杯，在570 nm 处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度(A)。
分别吸取1 mL 茶氨酸或谷氨酸系列标准工作液(6.4.2)于一组25 mL
比色管(5.3)中，各加pH 8.0 磷酸盐缓冲液(6.2)0.5 mL
和2%茚三酮溶液(6.3)0.5 mL, 在沸水浴中加热15 min, 冷却后加水定容至 25
mL,按7 . 3 . 2的操作测定吸光度(A) 。
将测得的吸光度与对应的茶氨酸或谷氨酸浓度绘制标准
曲线。
茶叶中游离氨基酸含量以干态质量分数(%)表示，按式(1)计算：
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GB/T 8314—2013
式中：
C
——根据7.3.2测定的吸光度从标准曲线上查得的茶氨酸或谷氨酸的毫克数，单位为毫克
(mg);
V₁— 试液总量，单位为毫升(mL);
V₂— 测定用试液量，单位为毫升(mL);
m ——试样用量，单位为克(g);
w— 试样干物质含量(质量分数),%。
如果符合重复性(8.2),取两次测定的算术平均值作为结果，保留小数点后1位。
在重复条件下同一样品获得的测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
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中 华 人 民 共 和 国
国 家 标 准
茶 游离氨基酸总量的测定
GB/T 8314—2013
芳
中国标准出版社出版发行
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2014年5月第一版
兴
书号：155066 ·1-48896
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